4.5.2. Проведение испытаний

При наличии признаков роста делают пересев петлей на чашки с одной из сред: п. 6.4.14.1 - желточно-солевой агар или п. 6.4.14.2 - Байрд-Паркер агар, или п. 6.4.14.3 - маннитно-солевой агар. Посевы на желточно-солевой и Байрд-Паркер агар инкубируют при температуре (37 +/- 1) °C в течение (48 +/- 3) ч, а посевы на маннитно-солевой агар - в течение (24 - 48 +/- 3) ч.

При росте на желточно-солевом агаре Staphylococcus aureus образует круглые, слегка возвышающиеся над поверхностью агара колонии с ровными краями диаметром 2 - 2,5 мм, окрашенные в желтый, золотистый, кремовый, палевый или белый цвет, окруженные зоной лецитиназной активности.

На среде Байрд-Паркер Staphylococcus aureus растет в виде черных блестящих колоний диаметром 1 - 1,5 мм, окруженных зоной лецитиназной активности.

Наличие на маннитно-солевом агаре колоний, окруженных желтыми зонами, свидетельствует о способности этих микроорганизмов ферментировать маннит.

Из подозрительных по морфологии колоний делают мазки и окрашивают по Граму. Стафилококки по Граму окрашиваются положительно, имеют шарообразную или близкую к ней форму с диаметром 0,6 - 1,0 мкм и располагаются обычно в виде скоплений, напоминающих гроздья винограда.

При обнаружении грамположительных кокков делают пересев на одну из скошенных сред, приготовленных по п. 6.4.7. Посевы инкубируют при (37 +/- 1) °C в течение (24 +/- 3) ч.

Выделенную чистую культуру пересевают в среду Гисса с маннитом или мальтозой по п. 6.4.14.4, разлитую высоким столбиком (посев производят уколом). Инкубируют при (37 +/- 1) °C в течение (24 +/- 3) ч.

В случае роста стафилококков на среде Гисса с маннитом или мальтозой наблюдается ферментация или окисление углевода, сопровождающиеся изменением цвета среды.

Выделенную чистую культуру исследуют на наличие фермента плазмокоагулазы.

Для проведения реакции в стерильную пробирку с 0,5 - 1,0 куб. см плазмы крови кролика, разведенной в 3 - 4 раза или приготовленной из сухого препарата промышленного производства, вносят одну петлю суточной агаровой культуры. Одну пробирку с плазмой крови оставляют незасеянной для контроля. Содержимое пробирок перемешивают и инкубируют при (37 +/- 1) °C в течение (24 +/- 3) ч. Результат учитывают через 2, 4, 6 и 24 ч.

При отсутствии свертывания плазмы через 24 ч исследуемую культуру относят к коагулазоотрицательной.

Реакцию считают положительной при образовании даже небольшого сгустка.