Приложение 6. Метод определения остаточного содержания акриламида в образцах анионного или неионного полиакриламида
(рекомендуемое)
ОПРЕДЕЛЕНИЯ ОСТАТОЧНОГО СОДЕРЖАНИЯ АКРИЛАМИДА В ОБРАЗЦАХ
АНИОННОГО ИЛИ НЕИОННОГО ПОЛИАКРИЛАМИДА
1. Принцип метода: мономер акриламид экстрагируется из образца анионного или неионного полиакриламида смесью воды и метанола, которая размягчает, но не растворяет полимер. Экстракт анализируют с помощью жидкостной хроматографии высокого разрешения (ЖХВР) с ультрафиолетовым детектором. Идентификация осуществляется сравнением с внешним стандартом, концентрация определяется измерениями площади пиков.
2.1.1. Стеклянные колбы емкостью около 125 мл с притертыми пробками.
2.1.2. Весы с точностью до 0,1 мг.
2.1.3. Лабораторный вибростол или смеситель.
2.1.6. Одноразовые фильтры для шприцов диаметром 25 мм, снабженные мембранами из поливинилфторида, с размером пор 0,45 мкм.
2.1.8. Сита из плетеной проволоки, размер апертуры - 1000 мкм.
2.2.1. Жидкостной хроматограф высокого разрешения с системой непрерывной подачи растворителя, клапаном введения образцов, контуром (петлей) на 5 мкм, термостатом для колонок, спектрометрическим ультрафиолетовым детектором с переменной длиной волны, регистрирующее устройство или электронный интегратор, колонка с наполнителем длиной 150 мм и внутренним диаметром 4,6 мм (к примеру, FISONS PLRP-S 100A).
2.2.2. Весы с точностью до 0,1 мг.
2.2.4. Пипетки с точностью 0,03 мл.
2.3.1. Гелий высокой чистоты, давление на линии 0,0069 кПа.
2.3.2. Акриламид (марки для электрофореза).
2.3.4. Фосфорная кислота 88% масс., плотность p = 1,75 г/куб. см.
2.3.5. Дигидрофосфат натрия дигидрат.
2.3.6. Элюент. Взвесить с точностью до 0,001 г 6,240 г дигидрофосфата натрия дигидрата и растворить его в 500 мл воды. Перенести количественно в мерную колбу на 2000 мл, заполнить колбу до метки и перемешать. Довести pH до 3,0 фосфорной кислотой. Дегазировать при помощи ультразвуковой бани или пропусканием через раствор гелия. Хранить элюент в бутылке из темного стекла.
2.3.7. Растворитель - метаноловодная смесь. Отмерить 800 мл метанола в мерный цилиндр на 1 л. Затем отмерить 200 мл воды в мерный цилиндр на 250 мл. Перелить воду в 1-й цилиндр, тщательно смешать, но без интенсивного перемешивания (произойдет уменьшение объема, что является нормальным). Дегазировать при помощи ультразвуковой бани или пропусканием через раствор гелия. Хранить смесь в бутылке из темного стекла.
2.3.8. Мономер акриламид, стандартный раствор для хранения (1000 мг/л). Взвесить с точностью до 0,001 г 0,5 г акриламида, поместить мономер в колбу и залить 200 мл метаноловодной смеси, затем перенести в мерную колбу на 500 мл и довести объем до метки растворителем. Хранить в герметичной склянке в холодильнике. Раствор устойчив в течение 4 недель.
2.3.9. Мономер акриламид, стандартный раствор (20 мг/л). Ввести пипеткой 5 мл основного раствора (1000 мг/л) в мерную колбу на 250 мл, довести объем до метки растворителем. Хранить в герметичной склянке в холодильнике. Раствор устойчив в течение 1 недели.
2.4.1. Подготовка образца для испытаний. Образцы, содержащие более 10 масс. % частиц размером более 1000 мкм, должны быть измельчены с помощью лабораторной дробилки, пока весь материал не будет проходить через сито с апертурой 1000 мкм. Полученный материал - проба A.
2.4.2. Подготовка пробы для анализа.
2.4.2.1. Взвесить с точностью до 0,001 г 4 г образца для испытаний (A), поместить его в колбу на 125 мл, добавить 40 мл метаноловодной смеси.
2.4.2.2. Плотно закрыть колбу и перемешивать на вибростоле или смесителе не менее 16 часов.
2.4.2.3. Полученный жидкий экстракт (проба Б) хранить в холодильнике не более 1 недели до анализа.
2.4.3. Условия хроматографирования:
- мобильная фаза / растворитель для элюирования - водный раствор 0,02 моль/л дигидрофосфата натрия при pH 3,0;
- объемная скорость потока - 1,5 мл/мин.;
- температура колонки - 40 °C;
- длина волны - около 220 нм в области максимального поглощения.
2.4.4. Анализ экстракта. Используя шприц, отобрать часть жидкого экстракта (образец Б). Установить фильтр шприца и иглу, удалить весь воздух, вставить иглу в отверстие для дозирования в 5 мкл петле. Промыть петлю приблизительно половиной содержимого шприца перед впрыскиванием в колонку. Измерить площадь пика с временем удерживания, соответствующим стандарту акриламида (предполагается, что отклик датчика - линейная функция концентрации, но линейность должна сначала быть установлена хроматографистом посредством калибровочного графика).
2.4.5. Для контрольного опыта повторить анализ (п. 2.4.4), используя вместо жидкого экстракта (образец Б) метаноловодную смесь.
2.4.6. Калибровка. Повторить анализ (п. 2.4.4), используя вместо жидкого экстракта (образец Б) стандартный раствор акриламида (20 мг/л). Проводить калибровку необходимо после анализа 4 - 5 образцов. Если площади пиков последовательных растворов изменяются больше чем на 10%, необходима корректировка процедуры.
2.4.7.1. Содержание остаточного акриламида (CA), выраженное в мг на кг продукта, рассчитывается по следующей формуле:
(AT - AB) x c x V
(AS - AB) x m
AT - площадь пика для образца Б;
AB - площадь пика контрольной пробы;
AS - площадь пика стандартного раствора;
c - концентрация стандартного раствора, мг/л;
V - объем растворителя, мл, здесь V = 40 мл;
2.4.7.2. Точность. Абсолютное различие между двумя отдельными
результатами, полученными при условии повторяемости, не должно
превышать величину повторяемости r, рассчитываемую по следующему
уравнению:
где Z - среднее из двух результатов, выраженных в мг/кг
продукта.
- Гражданский кодекс (ГК РФ)
- Жилищный кодекс (ЖК РФ)
- Налоговый кодекс (НК РФ)
- Трудовой кодекс (ТК РФ)
- Уголовный кодекс (УК РФ)
- Бюджетный кодекс (БК РФ)
- Арбитражный процессуальный кодекс
- Конституция РФ
- Земельный кодекс (ЗК РФ)
- Лесной кодекс (ЛК РФ)
- Семейный кодекс (СК РФ)
- Уголовно-исполнительный кодекс
- Уголовно-процессуальный кодекс
- Производственный календарь на 2023 год
- МРОТ 2024
- ФЗ «О банкротстве»
- О защите прав потребителей (ЗОЗПП)
- Об исполнительном производстве
- О персональных данных
- О налогах на имущество физических лиц
- О средствах массовой информации
- Производственный календарь на 2024 год
- Федеральный закон "О полиции" N 3-ФЗ
- Расходы организации ПБУ 10/99
- Минимальный размер оплаты труда (МРОТ)
- Календарь бухгалтера на 2024 год
- Частичная мобилизация: обзор новостей