Методика обнаружения этанола в биологической пробе

Во флакон из-под пенициллина, содержащий 0,5 мл раствора трихлоруксусной кислоты, вносят 0,5 мл исследуемой пробы. Флакон закрывают стандартной резиновой пробкой и фиксируют алюминиевым колпачком с помощью ПОК (прибор для обжима пенициллиновых флаконов).

После энергичного перемешивания во флакон шприцем вводят 0,35 мл раствора нитрита натрия. Содержимое флакона энергично встряхивают (30 маятникообразных движений) и оставляют на 1 минуту. Затем из флакона шприцем путем прокола пробки отбирают 0,5 мл парогазовой фазы, которую тотчас же вводят в прибор. С помощью секундомера измеряют время удерживания от начала выхода пика несорбирующегося компонента (воздуха) до максимума измеряемого пика. Это время удерживания вещества в колонке. При наличии в исследуемой крови алифатических спиртов на хроматограмме появляются пики соответствующих алкилнитритов.

По формулам 1, 2, 3 рассчитывают параметры удерживания:

o o

1) V = u x t удерживаемый объем V ,

Ri Ri Ri

2) Vg = ---- относительное время удерживания tg

V (или объем Vg)

Rcm

3) tg = ---- истинный удерживаемый объем V

t oi.

Rcm

По таблице 1 идентифицируют обнаруженные пики алкилнитритов.

Параметры удерживания алкилнитритов <*>

┌───┬────────────────────────────────────────────────────────────┐

│NN │ Наименование │

│п/п│ │

├───┼────────────────────────────────────────────────────────────┤

│1. │Метилнитрит 0,492 │

│2. │Этилнитрит 0,776 │

│3. │Изопропилнитрит 1,000 │

│4. │Изобутилнитрит 1,776 │

│5. │Изоамилнитрит 3,791 │

└───┴────────────────────────────────────────────────────────────┘

--------------------------------

<*> При вышеуказанных параметрах хроматографирования.

Для идентификации алкилнитритов достаточно вычислить относительное время удерживания.

Если на хроматограмме отсутствуют пики, то делают заключение

об обнаружении алфатических спиртов C - C .

1 5

Определение метрологических характеристик Количественное определение