Исследование in vitro

Сравнительные исследования in vitro проводятся для выявления возможных различий фармакодинамических свойств по способности связываться с рецептором и вызывать их активацию между биоаналогичным (биоподобным) и оригинальным (референтным) препаратами. Данные исследования могут быть проведены в рамках изучения биологической (специфической) активности при характеристике показателей качества препарата. Для реализации этой цели существует 2 основных подхода. При первом подходе в качестве клетки мишени используются зернистые (гранулезные) клетки или клетки Сертоли. При втором подходе создается постоянно культивируемая клеточная линия (например, на основе CHO), которая имеет стабильные трансфецированные рецепторы к рчФСГ. Преимущество первого подхода заключается в том, что изучение взаимодействия рчФСГ с рецептором осуществляется в условиях, максимально приближенных к естественным, а недостатком данного подхода является ограниченное число клеток тест-системы, что ограничивает количество повторов и использования различных разведений препаратов рчФСГ, которые необходимы для получения достоверных результатов оценки соотношения "концентрация - ответ".

Второй подход позволяет получать в большом количестве материал для исследования, однако зависит от полученной искусственной клеточной конструкции (трансфецированных клеток). Должна быть показана соответствующая чувствительность биотеста, использованного для проверки сопоставимости и выявления потенциальных отличий. Эксперименты должны быть проведены с достаточным числом разведений на каждую кривую для полной характеристики соотношения взаимосвязи "концентрация - ответ".

В исследованиях in vitro необходимо продемонстрировать способность связывания с рецептором, включая кинетику включения - выключения, а также результаты оценки активации рецепторов, т.е. продукции активатора плазминогена (только в классическом исследовании на первичных гранулезных клетках), или накопления внутриклеточного цАМФ. Возможны иные конечные точки (например, активация гена-репортера).

Должны быть представлены в регистрационное досье исследования связывания, включая кинетику включения - выключения, а также результаты оценки активации рецептора, т.е. выработки активатора плазминогена (только в классическом исследовании на первичных гранулезных клетках), или накопления внутриклеточного цАМФ. Заявитель вправе выбрать другие конечные точки (например, активацию гена-репортера). Заявитель должен обосновать выбранный подход в регистрационном досье.