Таблица 1.3.1. Состав питательной среды Гольдберга

Таблица 1.3.1

Состав питательной среды Гольдберга

Питательную среду для культивирования готовят на искусственной морской воде или на морской природной воде (черноморской, беломорской, балтийской, каспийской и т.д.), которую предварительно отбирают в незагрязненном районе. Морскую воду фильтруют через мембранный фильтр (размер пор 3,5 мкм). Дважды стерилизуют, нагревая до температуры 75 - 80 °C и охлаждая до комнатной температуры. В подготовленную таким образом морскую воду добавляют растворы N 1, N 2 и N 3 (см. таблицу 1.3.1). Затем среду стерилизуют третий раз, охлаждают и добавляют раствор N 4.

Приготовленную вышеописанным способом среду хранят в темном месте при комнатной температуре. Исходные растворы для приготовления среды хранят в холодильнике, в случае помутнения производят их замену.

Культивируют водоросли в конических колбах объемом 250 - 300 мл закрытых фольгой или ватно-марлевой пробкой в люминостате или климатостате, избегая попадания прямых солнечных лучей. Освещенность 3000 - 6000 люкс. Лампы дневного света размещают на расстоянии 30 - 40 см от поверхности культуры. Соблюдается световой суточный ритм. Температура при культивировании водорослей 20 +/- 2 °C. Культуру водорослей периодически перемешивают, встряхивая 1 - 2 раза в сутки.

Водоросли рекомендуется один раз в десять дней пересевать. Для этого в чистую простерилизованную колбу объемом 250 см3 со свежей средой (100 - 150 мл) над пламенем спиртовки приливают примерно 15 - 20 см верхнего росткового слоя из колбы ранее культивируемых водорослей. При этом получают начальную плотность клеток в колбе для культивирования, примерно 300 тыс. кл/см3. Колбу закрывают ватно-марлевыми пробками или фольгой, перемешивают, записывают на колбе название культуры, дату посева и ставят в люминостат.

В течение дня содержимое колбы следует перемешивать 1 - 2 раза.