2.1.2. Инъекция сперматозоида в цитоплазму яйцеклетки (метод ИКСИ)
ИКСИ - инъекция сперматозоида в цитоплазму яйцеклетки является вариантом экстракорпорального оплодотворения, которое достигается путем введения одного сперматозоида в ооцит с помощью специальных микроинструментов. Сперматозоид отбирается эмбриологом из множества других в обработанной сперме на основании нескольких параметров: степень подвижности и морфология, однако могут использоваться и другие характеристики (поверхностный электрический заряд мембраны, способность связываться с гиалуроновой кислотой, экспрессия маркеров апоптоза, оценка морфологии под большим увеличением).
ИКСИ является инвазивной, технически сложной и дорогостоящей маипуляцией по сравнению с классическим ЭКО. К признанным большинством специалистов показаний можно отнести: мужской фактор бесплодия, использование размороженных ооцитов, проведение ПГТ.
- Метод ИКСИ рекомендован при мужском факторе бесплодия, который проявляется в значительном снижении параметров эякулята: концентрации, подвижности и морфологии сперматозоидов. Уровень убедительности рекомендаций C (уровень достоверности доказательств - 4).
Комментарии: Общепризнанные характеристики эякулята, при которых показано ИКСИ, отсутствуют. Одни специалисты ориентируются на количество подвижных сперматозоидов в нативном эякуляте (менее 1 x 106 (138)), другие - на количество подвижных сперматозоидов в обработанной сперме (менее 0,2 x 106 (139) или 0,5 x 106 (140)), третьи - на концентрацию и морфологию сперматозоидов в нативном образце (менее 0,5 x 106 морфологически нормальных, прогрессивно-подвижных сперматозоидов на миллилитр (141)).
- Метод ИКСИ рекомендован при использовании сперматозоидов, полученных хирургическим путем. Уровень убедительности рекомендаций C (уровень достоверности доказательств - 4).
Комментарии: В большей части случаев материал, полученный оперативным путем, характеризуются низким качеством сперматозоидов (концентрация, степень подвижности и зрелости, количество морфологически нормальных форм).
- Метод ИКСИ рекомендован при использовании ооцитов после криоконсервации. Уровень убедительности рекомендаций C (уровень достоверности доказательств - 4)
Комментарии: Считается, что удаление кумулюса перед криоконсервацией, и сама криоконсервация ведут к изменениям в блестящей оболочке, что может снизить вероятность оплодотворения при классическом ЭКО. Результаты научных исследований по данной теме немногочисленны и противоречивы (146, 147).
- Метод ИКСИ рекомендован при проведении преимплантационного генетического тестирования методом ПЦР (148). Уровень убедительности рекомендаций C (уровень достоверности доказательств - 4).
Комментарии: Технология ИКСИ предполагает полное удаление кумулюса с поверхности ооцита и введение единичного сперматозоида. Это снижает возможный риск контаминации образца для генетического тестирования ДНК кумулюсных клеток и сперматозоидов, прикрепленных к внешней поверхности блестящей оболочки.
Ниже перечислены показания, в отношении которых нет консенсуса или имеются сведения об их необоснованности:
- Метод ИКСИ рекомендован при проведении преимплантационного генетического тестирования, включающего этап полногеномной амплификации (a-CGH, NGS). Уровень убедительности рекомендаций C (уровень достоверности доказательств - 4).
Комментарии: ИКСИ снижает возможный риск контаминации образца для генетического тестирования ДНК кумулюсных клеток и сперматозоидов, прикрепленных к внешней поверхности блестящей оболочки. При этом РКИ по данной теме в настоящее время отсутствуют, потенциальные риски контаминации оправдывают использование ИКСИ при ПГГ (149, 150).
- Метод ИКСИ рекомендован при неудаче оплодотворения в предыдущей попытке со стандартным ЭКО (151 - 153). Уровень убедительности рекомендаций C (уровень достоверности доказательств - 4).
Комментарии: К неудаче оплодотворения относят частоту оплодотворения от 0 до 20%. Консенсус по данному показанию отсутствует. Результаты научных исследований по целесообразности использования ИКСИ противоречивы. Практический комитет ASRM полагает, что использование ИКСИ при неудачной первой попытке ЭКО может снизить риск неудач в повторных попытках (151). Одно проспективное исследование показало преимущество ИКСИ перед стандартным ЭКО в отношении частоты оплодотворения (48% против 11%). Однако исследуемая группа была небольшой - 38 пар, а данные по частоте наступления беременности не приводятся (152). По данным ретроспективного исследования, у 87% пар с неудачами оплодотворения методом ЭКО в первой попытке достигается оплодотворение в последующих попытках с ЭКО. А ЧНБ при этом сравнима с таковой для ИКСИ. Поэтому авторы полагают, что нужно предпринимать повторные попытки с классическим методом оплодотворения - менее инвазивным и дорогостоящим (153).
- Метод ИКСИ не рекомендован при бесплодии неясного генеза, если другие показания для ИКСИ отсутствуют (154). Уровень убедительности рекомендаций C (уровень достоверности доказательств - 4).
Комментарии: Результаты исследований противоречивы, выборки невелики. Одна часть работ демонстрирует преимущество ИКСИ в отношении частоты оплодотворения и случаев полного отсутствия оплодотворения, другая - не выявила различий в отношении частоты оплодотворения, качества эмбрионов, частоты имплантации и клинической беременности (154).
- Метод ИКСИ не рекомендован при малом числе полученных ооцитов (менее 4 - 6), если другие показания для ИКСИ отсутствуют (155, 156). Уровень убедительности рекомендаций B (уровень достоверности доказательств - 3).
Комментарии: Не выявлено преимуществ ИКСИ перед классическим ЭКО у пациенток с малым количеством полученных ооцитов в отношении частоты оплодотворения, качества эмбрионов, ЧНБ и выкидышей (155, 156).
- Метод ИКСИ не рекомендован при низком качестве ооцитов, если другие показания для ИКСИ отсутствуют. Уровень убедительности рекомендаций C (уровень достоверности доказательств - 4).
Комментарии: Предполагается, что ИКСИ может являться более подходящим методом оплодотворения ооцитов низкого качества (согласно визуальной оценке морфологии яйцеклетки и кумулюса) (151). Однако нет опубликованных исследований, подтверждающих преимущество ИКСИ перед традиционным ЭКО.
- Метод ИКСИ не рекомендован при позднем репродуктивном возрасте женщины (старше 35 лет), если другие показания для ИКСИ отсутствуют (157). Уровень убедительности рекомендаций C (уровень достоверности доказательств - 4).
Комментарии: Нет исследований, в которых оценивалось преимущество ИКСИ в отношении качества эмбрионов и частоты имплантации для старшей возрастной группы. Частота оплодотворения ооцитов женщин старше 35 лет сравнима с таковой для более молодых пациенток (157).
- Метод ИКСИ может быть рекомендован в программах с созреванием ооцитов in vitro (158, 159). Уровень убедительности рекомендаций C (уровень достоверности доказательств - 4).
Комментарии: манипуляции с ооцитами при проведении IVM могут вести к изменениям в zona pellucida, что, в свою очередь, снижает вероятность оплодотворения с применением традиционного метода ЭКО. Исследования демонстрируют более высокую частоту оплодотворения ооцитов, созревших in vitro, при использовании ИКСИ по сравнению с классическим методом инсеминации (158, 159). Однако частота имплантации эмбрионов ниже в группе ИКСИ, а различия по ЧНБ между группами статистически не значимы (160).
Подготовка ооцитов перед ИКСИ:
- При подготовке к ИКСИ рекомендуется проводить денудацию ооцитов ближе к моменту оплодотворения (144). Уровень убедительности рекомендаций C (уровень достоверности доказательств - 4).
Комментарии: На данный момент нет доказательств в пользу того, что денудация ооцитов должна быть осуществлена в определенное время после пункции; однако, так как денудированные ооциты более чувствительны к изменениям уровня pH, рекомендуется проводить денудацию ближе к процедуре ИКСИ (144).
- ИКСИ рекомендуется проводить только ооцитам на стадии MII (метафаза II). Уровень убедительности рекомендаций C (уровень достоверности доказательств - 4).
- Данную манипуляцию рекомендуется проводить в условиях, близких к оптимальным: температура 37 °C, время нахождения ооцитов вне инкубатора минимально (не более 10 мин). Уровень убедительности рекомендаций C (уровень достоверности доказательств - 4).
- При проведении ИКСИ рекомендуется выбирать морфологически нормальный, подвижный сперматозоид. Уровень убедительности рекомендаций C (уровень достоверности доказательств - 4).
- Гражданский кодекс (ГК РФ)
- Жилищный кодекс (ЖК РФ)
- Налоговый кодекс (НК РФ)
- Трудовой кодекс (ТК РФ)
- Уголовный кодекс (УК РФ)
- Бюджетный кодекс (БК РФ)
- Арбитражный процессуальный кодекс
- Конституция РФ
- Земельный кодекс (ЗК РФ)
- Лесной кодекс (ЛК РФ)
- Семейный кодекс (СК РФ)
- Уголовно-исполнительный кодекс
- Уголовно-процессуальный кодекс
- Производственный календарь на 2023 год
- МРОТ 2024
- ФЗ «О банкротстве»
- О защите прав потребителей (ЗОЗПП)
- Об исполнительном производстве
- О персональных данных
- О налогах на имущество физических лиц
- О средствах массовой информации
- Производственный календарь на 2024 год
- Федеральный закон "О полиции" N 3-ФЗ
- Расходы организации ПБУ 10/99
- Минимальный размер оплаты труда (МРОТ)
- Календарь бухгалтера на 2024 год
- Частичная мобилизация: обзор новостей