11.8. Преимплантационное генетическое тестирование

Термин преимплантационное генетическое тестирование (ПГТ/PGT - Preimplantation Genetic Testing) объединяет все виды анализа наследственного материала ооцитов (полярных тел) и эмбрионов (биопсия клеток на стадии дробления или бластоцисты), проводящиеся до момента имплантации в стенку матки, для выявления потенциальных аномалий или HLA-типирования. Он объединяет следующие группы исследований:

- ПГТ-А/PGT-A - все тесты, направленные на определение количественных хромосомных изменений (анеуплоидий),

- ПГТ-М/PGT-M - все тесты, направленные на диагностику моногенных заболеваний и выявления отдельных генных аллелей,

ПГТ-СП/PGT-SR - все тесты, направленные на выявление структурных хромосомных перестроек [168].

Решение о проведении ПГТ является добровольным, исследование проводится только с информированного согласия пациентов после консультации врача-акушера-гинеколога и врача-генетика. Проведение ПГТ-А показано:

- женщинам позднего репродуктивного возраста - 35 лет и старше;

- при привычном выкидыше (2 и более самопроизвольных прерываний беременности в анамнезе),

- при повторных неудачных попытках переноса "свежих" или размороженных эмбрионов (3-х у женщин моложе 35 лет, 2-х - у женщин 35 лет и старше),

- при тяжелых нарушениях сперматогенеза у мужчин (олигоастенотератозооспермия, олигозооспермия, азооспермия - по заключению врача-уролога).

Проведение ПГТ-М и ПГТ-СП показано [41]:

- носителям генных мутаций, сцепленных с X-хромосомой;

- при высоком риске рождения детей с наследственными заболеваниями;

- носителям генных мутаций, вызывающие моногенные заболевания: аутосомно-рецессивные, аутосомно-доминантные, имеющие высокий риск передачи наследственной патологии потомству;

- носителям хромосомных аномалий: числовых и структурных аберраций хромосом;

- носителям генных мутаций, сцепленных с Y-хромосомой;

- носителям генных мутаций, значительно повышающих риск развития онкологических заболеваний и болезней с поздней манифестацией;

- носителям наследственных гематологических заболеваний;

- женщинам с носительством мутаций мтДНК, имеющим высокий риск тяжелого течения митохондриальной болезни у потомства;

- семьям, в которых есть ребенок больной спорадическим гематологическим заболеванием, нуждающийся в пересадке донорских стволовых гемопоэтических клеток для продолжения жизни.

Уровень доказательности 4C.

Для выполнения ПГТ могут быть использованы следующие технологические платформы и лабораторные методы исследования с учетом их возможностей и ограничений [169], [170], [171]:

- мультиплексная или гнездовая полимеразная цепная реакция (ПЦР) с последующим капиллярным секвенированием или электрофорезом;

- флуоресцентная гибридизация in situ (FISH);

- сравнительная геномная гибридизация на микроматрицах (a-CGH), микроматричный анализ однонуклеотидного полиморфизма (SNP array);

- высокопроизводительное секвенирование (NGS).

Тактика ПГТ в лаборатории ВРТ определяется на основе метода лабораторного генетического исследования и основывается на следующих рекомендациях [170]:

- применение ИКСИ не является обязательным условием ПГТ, однако в случае применения ЭКО без ИКСИ генетическая лаборатория должна знать об этом;

- необходимо применять рекомендованные генетической лабораторией методы снижения риска контаминации образца посторонней ДНК;

- приоритетами при выборе метода биопсии должны являться, в первую очередь, уменьшение травматичности процедуры и, во вторую, - увеличение информативности анализа с использованием получаемого биоматериала;

- Оптимальное число клеток трофэктодермы в биоптате - 5.

Уровень доказательности 3C.