2.3.2 Специфическая лабораторная диагностика

Лабораторное обследование в целях идентификации возбудителя гриппа проводится в обязательном порядке при:

- госпитализации пациента по поводу ОРВИ верхних и нижних дыхательных путей (тяжелые и необычные формы заболевания);

- заболевании лиц с высоким риском неблагоприятного исхода гриппа и ОРВИ (в том числе беременных, лиц с хроническими заболеваниями сердца, легких, метаболическим синдромом и других);

- регистрации очагов ОРВИ с множественными случаями заболеваний в организованных коллективах взрослых с числом пострадавших 5 и более человек в один инкубационный период, заболевании лиц из организаций с круглосуточным пребыванием.

- Рекомендуется произвести забор не менее трех видов клинического материала [50 - 52, 63, 64, 67 - 75]:

- смывы из полости носа и ротоглотки (для анализа методом ПЦР);

- мазки из полости носа и ротоглотки (для анализа методом ПЦР);

- носоглоточное отделяемое (для выделения вируса, для анализа методом ПЦР);

- аспираты из трахеи, бронхоальвеолярный лаваж и биоптаты легких (при возможности их забора);

- аутоптаты легких, трахеи и селезенки (у умерших).

Уровень убедительности рекомендаций C (уровень достоверности доказательств - 3)

Комментарии: оптимальный срок сбора клинического материала - в течение 3 суток после манифестации болезни или в первый день госпитализации (в более поздние сроки не исключена возможность суперинфекции при контакте с другими пациентами в стационаре), предпочтительно до начала противовирусной терапии. От одного пациента обязательно забирается: мазки из полости носа и ротоглотки и носоглоточное отделяемое. От одного пациента отбирают две пробы: одну пробу для проведения первичного исследования материала методами ПЦР, вторую - для проведения вирусологического исследования. Все виды работ проводят с соблюдением противоэпидемического режима, в строгом соответствии с требованиями действующих нормативно-методических документов.

Правила забора материала для исследований представлены в Приложении Г2.

- Рекомендуется для ранней диагностики и скрининга гриппа использовать метод ОТ-ПЦР и/или ПЦР-РВ [50 - 52, 63, 64, 75 - 83].

Уровень убедительности рекомендаций A (уровень достоверности доказательств - 1a).

Комментарии: ПЦР наиболее эффективный метод, который позволяет обнаружить нуклеиновые кислоты вируса в среднем до 7 дней, и максимум - до 2 недель от начала заболевания (при условии сохранения признаков поражения верхних дыхательных путей). Результаты получают в течение 4 - 6 часов после представления образца.

- Рекомендуется в эпидемиологических целях для массового скрининга определение антигенов вируса гриппа [50 - 52, 63, 64, 84 - 91].

Уровень убедительности рекомендаций C (уровень достоверности доказательств - 4)

Комментарии: тесты на основе иммунохроматографии используются для выявления антигенов вирусов гриппа. Для обнаружения антигенов вирусов гриппа A и B используется также метод ИФА. Тесты на основе иммунофлуоресценции (РИФ, ПИФ, РПИФ и др.) применяют для обнаружения в мазках из респираторного тракта антигенов вирусов, находящихся внутри клеток слизистой оболочки. Тесты используются только в эпидемиологических целях для массового скрининга, поскольку их аналитические характеристики могут варьировать в широких пределах, давать ложноотрицательные результаты (недостаточная чувствительность по сравнению с культуральными методами и ПЦР), и давать ложноположительные результаты в межэпидемический период (в силу недостаточной специфичности и субъективности интерпретации анализа).

- Рекомендуется произвести исследование в стандартных серологических тестах парных сывороток крови пациента (при условии соблюдения сроков сбора сывороток крови: первая - в день постановки диагноза, вторая - через 2 - 3 недели) [50 - 52, 63, 64, 92, 93].

Уровень убедительности рекомендаций C (уровень достоверности доказательств - 4).

Комментарии: выявление специфических антител в сыворотках крови выполняют с использованием РТГА, ИФА и РСК. Достоверность результата увеличивается в случае выявления 4-кратного и более нарастания титра специфических антител в парных сыворотках с соблюдением сроков исследования. Обнаружение антител к вирусам гриппа методом ИФА уступает по чувствительности и специфичности РТГА.

- Рекомендуется проведение бактериологического исследования мокроты и крови для выявления бактериальных очагов, не определяемых клиническими методами, с выявлением возбудителей и их чувствительности к антибиотикам [50 - 52, 63, 64].

Уровень убедительности рекомендаций C (уровень достоверности доказательств - 4)

Комментарий: обязательное бактериологическое исследование мокроты и крови необходимо проводить перед началом антибактериальной терапии.