ВВЕДЕНИЕ

Белки клетки-хозяина представляют собой производственные примеси, источником которых является организм, из которого получены клетки, используемые в производстве лекарственного средства с использованием технологии рекомбинантной ДНК. Предполагают, что снижение содержания белков клетки-хозяина до минимально возможного уровня уменьшит побочные эффекты лекарственного препарата (например, иммуногенность).

Необходимо оценить эффективность удаления белков клетки-хозяина в процессе очистки. Содержание белков клетки-хозяина должно быть количественно определено с помощью методики, разработанной и валидированной для конкретного лекарственного средства.

Предел содержания остаточных белков клетки-хозяина, выраженный, как правило, в нанограммах на миллиграмм действующего (активного) вещества (ppm), должен быть обоснован с учетом эффективности процесса очистки в отношении белков клетки-хозяина и их потенциального влияния на организм пациента, исходя из введения максимального количества остаточных белков клетки-хозяина с дозой лекарственного препарата.

При определении допустимых пределов содержания необходимо учитывать, что невозможно установить общий предел содержания остаточных белков клетки-хозяина для всех конкретных лекарственных препаратов, в связи с тем, что качественные и количественные характеристики остаточных белков клетки-хозяина изменяются от одного продукта к другому и даже от одной процедуры производства (очистки) к другой.

Определение остаточных белков клетки-хозяина, как правило, проводят методами иммуноферментного анализа (ИФА), используя в качестве реактивов специально приготовленный антиген (антигены) белка клетки-хозяина или стандартный образец белков клетки-хозяина и соответствующие поликлональные антитела. Антисыворотка должна содержать антитела к широкому спектру белков клетки-хозяина, характерных для конкретного лекарственного средства.

Для определения остаточных белков клетки-хозяина чаще всего используют метод "сэндвич" ИФА. Следует учитывать, что содержание остаточных белков клетки-хозяина, определяемое с помощью ИФА, не отражает абсолютное массовое содержание примесных белков. Чувствительность реакции обусловлена результатом, наблюдаемым при совокупной ответной реакции на множество отдельных белков клетки-хозяина, в сравнении с ответной реакцией на стандартный образец белка клетки-хозяина. При разработке и выборе метода определения остаточных белков клетки-хозяина для получения характеристик различных белков клетки-хозяина, содержащихся в лекарственном средстве, рекомендуется использовать ортогональные аналитические методы (например, электрофорез, ВЭЖХ, вестерн-блоттинг, масс-спектрометрия).