2.1.5.19. Метод формольного титрования (201050019-2022)

Настоящая общая фармакопейная статья распространяется на метод формольного титрования, предназначенный для определения аминного азота свободных (концевых) аминогрупп в препаратах аминокислот, пептидов, белков и других с содержанием азота 1,5 - 5,0 мг в 1 мл испытуемого раствора. Метод формольного титрования (метод Серенсена) основан на защите формальдегидом свободных аминогрупп с образованием оснований Шиффа и алкалиметрическом титровании эквивалентного количества карбоксильных групп.

Метод не применим в случае присутствия ионов аммония, так как при этом высок риск получения завышенных результатов определения.

К точной навеске или точному объему испытуемого образца, указанного в частной фармакопейной статье, прибавляют воду P до объема 20 мл. При необходимости раствор нейтрализуют потенциометрически до pH 7,0, путем прибавления 0,1 M раствора натрия гидроксида или 0,1 M хлороводородной кислоты. По окончании нейтрализации прибавляют от 2 до 10 мл (конкретные величины указывают в частной фармакопейной статье) формальдегида раствор P, нейтрализованного в день анализа натрия гидроксида раствором 10% до pH 7,0, перемешивают и титруют 0,1 M раствором натрия гидроксида до значения pH 9,1 или до появления слабо-розового окрашивания (индикатор - фенолфталеина раствор P1), не изменяющихся при перемешивании в течение 2 мин.

Параллельно проводят контрольный опыт.

В зависимости от количества функциональных групп в определяемом соединении титр будет разным и должен быть установлен для каждого конкретного случая.

В частности, при определении аминного азота 1 мл 0,1 M раствора натрия гидроксида соответствует 1,4 мг аминного азота.