9. УСТРАНЕНИЕ МЕШАЮЩИХ ФАКТОРОВ

Методики устранения мешающих факторов не должны приводить к увеличению или уменьшению (например, вследствие адсорбции) количества бактериальных эндотоксинов в испытуемом образце. Корректный способ проверки эффективности нейтрализации мешающих факторов состоит в применении метода добавок, который представляет собой добавление к испытуемому образцу известного количества бактериальных эндотоксинов с последующим измерением их открываемости.

Методы C и D. Если мешающие факторы обусловлены природой субстанции для фармацевтического применения или лекарственного препарата и не могут быть устранены общепринятыми методами (например, разведением или центрифугированием), возможно построение калибровочной кривой с использованием испытуемого образца той же субстанции для фармацевтического применения или лекарственного препарата, но очищенного от эндотоксинов путем соответствующей обработки или разведения. Испытание на бактериальные эндотоксины проводят путем сравнения с указанной калибровочной кривой.

Установлено, что в большинстве случаев подходит ультрафильтрация с использованием асимметричных мембранных фильтров из триацетата целлюлозы. Фильтры должны быть надлежащим образом проверены, поскольку при некоторых обстоятельствах производные целлюлозы могут быть причиной ложноположительных результатов.

Другим вариантом удаления мешающих факторов является двухэтапная процедура, при которой на первом этапе бактериальные эндотоксины в испытуемом образце с мешающими факторами фиксируют на твердой фазе (например, метод предварительного концентрирования с использованием твердофазной экстракции), а на втором - после удаления мешающих факторов (например, путем промывки) бактериальные эндотоксины обнаруживают в неизменном виде в подходящих условиях испытания.