Подготовлена редакция документа с изменениями, не вступившими в силу

3.2.3. Метод случайных блоков с использованием двух доз (на примере биологической активности окситоцина на петушке)

При использовании петушка в качестве тест-объекта, ответом является величина падения артериального давления (мм.рт.ст.) при введении двух доз стандартного образца окситоцина и двух доз испытуемого образца.

Петушку вводили по две дозы стандартного образца и две дозы испытуемого образца окситоцина (соотношение доз 1:2). Порядок введения доз и ответы тест-объекта приведены в таблице 3.2.3.-8.

Таблица 3.2.3.-8. - Порядок введения доз и ответы петушка на введение стандартного образца и испытуемого образца окситоцина (метод случайных блоков с использованием двух доз)

s1

s2

u1

u2

Блоки (R)

1.

12

20

14

20

66

2.

15

23

16

22

76

3.

15

20

14

23

72

4.

15

20

14

24

73

Для того чтобы проверить статистическую значимость источников вариации, пригодность результатов и вычислить дисперсию опыта, проводят дисперсионный анализ полученных данных. При этом рассчитывают значения дисперсий для 7 источников (сводная таблица 3.2.3.-10).

Для этого на основании данных, представленных в таблицах 3.2.3.-8 и 3.2.3.-9, а также поправочного коэффициента, вычисляют суммы квадратов источников дисперсии.

Таблица 3.2.3.-9. - Суммы ответов и контрасты (метод случайных блоков с использованием двух доз)

Стандартный образец 00001390.wmz

Испытуемый образец 00001391.wmz

Сумма

Малая доза

S1 = 57

U1 = 58

Большая доза

S2 = 83

U2 = 89

Сумма

S = 140

U = 147

00001392.wmz

Линейный контраст

LS = 26

LU = 31

00001393.wmz

Таблица 3.2.3.-10. - Сводная таблица дисперсионного анализа (метод случайных блоков с использованием двух доз)

Источник дисперсии (показатель)

Число степеней свободы (f)

Сумма квадратов

Средний квадрат 00001394.wmz

Наблюдаемое значение критерия Фишера Fнабл.

Критическое значение критерия Фишера Fкритич.

Препараты

1

3,065

3,065

Регрессия

1

203,06

203,06

151,54

> 10,56

(p = 0,01)

Непараллельность

1

1,565

1,565

1,17

< 5,12

(p = 0,05)

Постановки

k - 1 = 4 - 1 = 3 = fn.

207,69

69,23

Блоки

n - 1 = 3 - fб.

13,19

4,40

3,28

< 6,99

(p = 0,01)

Отклонение

N - 1 - fn. - fб. - m = 9

12,06

1,34

Итог

N - 1 - m = 15

232,94

15,53

n = 4 (число ответов на дозу); N = 16 (общее число ответов в опыте); m = 0 (число утраченных и замененных значений).

Поправочный коэффициент

00001395.wmz;

00001396.wmz;

00001397.wmz;

00001398.wmz;

00001399.wmz;

00001400.wmz;

00001401.wmz;

Отклонение = итог - постановки - блоки =

= 232,94 - 207,69 - 13,19 = 12,06.

Значимость различий дисперсий проверяют с помощью критерия Фишера. Обязательным является выполнение требований для показателей Регрессия, Непараллельность и Блоки. Для Регрессии наблюдаемое значение критерия Фишера должно быть больше критического (p = 0,01), а для Непараллельности и Блоков - меньше критического (p = 0,05 и p = 0,01 соответственно). Для того чтобы найти Fнабл., средние квадраты показателей делят на средний квадрат показателя Отклонение. Полученные результаты сравнивают с табличными критическими значениями критерия Фишера (таблица 3 Приложения). Число степеней свободы f1 = 1 или 3, а f2 = 9.

Дисперсионный анализ показал пригодность результатов опыта: статистическую значимость дозозависимости (Регрессия), параллельность двух линий регрессии (Непараллельность) и отсутствие статистически значимых различий между блоками (Блоки).

Вычисление биологической активности и ее доверительных границ

Соотношение доз равно 2, следовательно I = lg2,0 = 0,3010;

t = 1,958788 + 2,429953 / f + 2,189891 / f2 +

= 4,630189 / f3 + 1,398179 / f9 = 2,262,

при f = 9 и p = 0,05;

00001402.wmz;

00001403.wmz;

00001404.wmz;

00001405.wmz;

Ожидаемая активность AU = 5 МЕ/мл

00001406.wmz;

Биологическая активность

RU = 100,736 = 5,45 МЕ/мл

C = E / (E - s2t2) =

= 203,06 / (203,06 - 1,34 · 2,2622) = 1,035.

Логарифмические доверительные границы биологической активности испытуемого образца вычисляют по формуле:

00001407.wmz.

Логарифмические доверительные границы биологической активности испытуемого образца составляют -0,0185 и 0,0950. Нижняя и верхняя доверительная граница составляет 00001408.wmz и 00001409.wmz, т.е. 4,79 МЕ/мл и 6,22 МЕ/мл соответственно.