2.1.11.18. УРОНОВЫЕ КИСЛОТЫ В ПОЛИСАХАРИДНЫХ ВАКЦИНАХ

Испытуемый раствор. Содержимое упаковки с испытуемым образцом количественно переносят в мерную колбу подходящего объема и доводят водой P для получения раствора полисахарида с концентрацией около 5 мг/мл. Разводят раствор так, чтобы объемы, используемые в испытании, содержали от 4 мкг до 40 мкг глюкуроновой кислоты (уроновых кислот). Помещают 0,25 мл, 0,50 мл и 1,0 мл полученного раствора в 3 пробирки.

Растворы сравнения. 50 мг натрия глюкуроната P растворяют в воде P и доводят тем же растворителем до объема 100,0 мл (основной раствор с концентрацией глюкуроновой кислоты 0,4 г/л). Непосредственно перед использованием 5,0 мл основного раствора разводят водой P до объема 50,0 мл (рабочее разведение с концентрацией глюкуроновой кислоты 40 мг/л). В 5 пробирок помещают 0,10 мл, 0,25 мл, 0,50 мл, 0,75 мл и 1,0 мл рабочего разведения.

Компенсационный раствор. Готовят, используя 1,0 мл воды P.

Объем в каждой пробирке доводят водой P до 1,0 мл. Помещают пробирки в ледяную баню и при постоянном перемешивании прибавляют в каждую пробирку по каплям по 5,0 мл буры раствора P. Закрывают пробирки пробками и выдерживают в водяной бане 15 мин. Охлаждают до температуры от 15 °C до 25 °C. В пробирки добавляют по 0,20 мл раствора 1,25 г/л карбазола P в этаноле P. Закрывают пробирки пробками и выдерживают в водяной бане 15 мин. Охлаждают до температуры от 15 °C до 25 °C. Измеряют оптическую плотность (2.1.2.24) растворов при длине волны 530 нм.

Строят калибровочную кривую зависимости значений оптической плотности пяти растворов сравнения от содержания глюкуроновой кислоты и с ее помощью определяют концентрацию глюкуроновой кислоты в испытуемом растворе для каждого исследуемого объема. Рассчитывают среднее по трем значениям концентрации глюкуроновой кислоты.

201110019-2023