2.3.2.2. Анализ маркированных гликанов

Маркирование гликанов

Тип производимого химического изменения (дериватизации) зависит от метода, используемого для детектирования гликанов: УФ или флуоресцентный.

Дериватизация с флуоресцентными метками - наиболее используемый метод для маркирования гликанов по восстанавливающему концу молекулы путем восстановительного аминирования. Одна метка может быть присоединена к каждому одинарному моно- и олигосахариду, позволяя определить молярное количество. В таблице 2.1.2.56.-2 приведен неполный список обычно используемых флуоресцентных маркеров и подходящих аналитических методов.

Таблица 2.1.2.56.-2. - Примеры флуоресцентных меток и подходящих аналитических методов

Название	Аббревиатура	Аналитические методы
2-Аминобензойная кислота	2-AA	Жидкостная хроматография (2.1.2.28), масс-спектрометрия (2.1.2.51)
2-Аминобензамид	2-AB	Жидкостная хроматография (2.1.2.28), масс-спектрометрия (2.1.2.51)
2-Аминопиридин	2-AP	Жидкостная хроматография (2.1.2.28), масс-спектрометрия (2.1.2.51)
2-Амино-9(10H)-акридинон	AMAC	Гель-электрофорез (2.1.2.30)
Тринатрия 8-аминопирин-1,3,6-трисульфонат	APTS	Капиллярный электрофорез (2.1.2.37)

Для детектирования с использованием только масс-спектрометрии (2.1.2.51) также может использоваться предельное метилирование гликанов. Оно основано на метилировании олигосахаридов.

Анализ маркированных гликанов

Маркированные гликаны могут быть проанализированы с помощью таких аналитических методов, как жидкостная хроматография (2.1.2.28), капиллярный электрофорез (2.1.2.37) и масс-спектрометрия (2.1.2.51).

В соответствии со свойствами разделяющихся гликанов, они могут быть профилированы и определены количественно с использованием подходящего маркера с помощью нескольких систем жидкостной хроматографии (2.1.2.28): обращенно-фазная (разделение по гидрофобности), нормально-фазная (разделение по размеру), и анионообменная (разделение по заряду) жидкостная хроматография.

2.3.2.1. Анализ немеченых гликанов 2.4. Анализ моносахаридов