ИСПЫТАНИЕ АКТИВНОСТИ

В случае, когда невозможно установить соответствие между результатами методов in vitro и in vivo из-за низкой разрешающей способности и (или) высокой вариабельности испытания in vivo, можно использовать следующий подход. Предполагают, что испытуемый лекарственный препарат имеет надлежащим образом установленный профиль безопасности и эффективности при промышленном производстве.

Испытания in vitro должны позволять обнаруживать различия, при соответствующем научно обоснованном контроле производственного процесса. Это должно быть подтверждено данными о способности предлагаемых испытаний контролировать ключевые характеристики качества вакцины и отражать соответствие между качеством серий, подлежащих выпуску, и сериями, признанными безопасными и эффективными в ходе клинических исследований или рутинных испытаний. Разработка соответствующих спецификаций с использованием методов in vitro позволит обеспечивать постоянство процесса производства. При разработке испытаний для контроля качества вакцины необходимо учитывать, что они должны отражать как содержание антигена, так и его функциональность. Если используется один метод, он должен предпочтительно измерять содержание и целостность антигена путем таргетного связывания эпитопов, относящихся к защите, обеспечиваемой вакциной. Например, моноклональное антитело или моноклональные антитела против эпитопа или эпитопов как основные мишени для создания нейтрализующих антител. Эпитоп или эпитопы предпочтительно должны быть конформационными, чтобы можно было провести испытание, указывающее на стабильность (например, вакцина для профилактики бешенства). В некоторых случаях единственный метод in vitro не может адекватно отражать и содержание, и функциональность. В таком случае используют несколько испытаний, как, например, для конъюгированных полисахаридных вакцин, где используют соответствующие измерения размера молекул, целостности конъюгата, общих и свободных полисахаридов.

Для проведения количественных измерений методом in vitro необходимы образцы, которые различаются по величине ответа. В большинстве случаев образцы, активность которых ниже минимальной утвержденной в спецификации при использовании метода in vivo, не доступны для использования, потому что постоянство состава лекарственного препарата, как правило, хорошо поддерживается, а активность между сериями существенно не отличается и (или) точность испытания in vivo такова, что он не может дифференцировать серии, если разница не очень велика. Первоначальную оценку испытания проводят с образцами различных концентраций, после чего можно проводить испытание образцов, подвергавшихся воздействию различных типов стрессовых условий, чтобы дополнительно установить возможность новым методом оценивать стабильность лекарственного препарата. Невозможность подтвердить соответствие между методами in vitro и in vivo не обязательно означает, что метод in vitro не пригоден. Во многих случаях метод in vitro позволяет обнаруживать изменения в лекарственном препарате, которые не могут быть обнаружены методом in vivo. В таких случаях метод in vitro может считаться лучшим для мониторинга стабильности процесса производства и может быть более подходящим для оценки влияния изменений в производстве на качество вакцины.