1. ВВЕДЕНИЕ

Эндотоксины грамотрицательных бактерий являются самой распространенной причиной токсических реакций, возникающих в результате загрязнения фармацевтической продукции пирогенами; их общая пирогенная активность намного выше, чем у других известных пирогенных веществ. Бактериальные эндотоксины представляют собой липополисахариды, которые являются термостабильным компонентом наружной части клеточной стенки всех грамотрицательных микроорганизмов. Существует лишь небольшое количество пирогенов, обладающих иной структурой. В целом, по отсутствию бактериальных эндотоксинов в субстанции для фармацевтического применения и (или) лекарственном препарате можно сделать вывод об отсутствии пирогенных веществ при условии, что наличие пирогенов неэндотоксиновой природы исключено. Испытания на пирогенность (2.1.6.2) и на активацию моноцитов (2.1.6.13) являются подходящими методами для определения отсутствия пирогенов неэндотоксиновой природы в субстанции для фармацевтического применения и лекарственном препарате.

Присутствие бактериальных эндотоксинов может быть замаскировано факторами, влияющими на реакцию между эндотоксинами и лизатом амебоцитов мечехвоста. На обнаружение эндотоксинов могут влиять условия и (или) время хранения образцов и реактивов. Следовательно, перед проведением испытания на бактериальные эндотоксины или перед выбором между испытаниями на бактериальные эндотоксины и на пирогенность или на активацию моноцитов, необходимо подтвердить возможность его проведения для конкретной субстанции для фармацевтического применения и (или) лекарственного препарата; при этом может быть необходимо выполнение процедуры устранения мешающих факторов.

Согласно указаниям общей фармакопейной статьи 2.1.6.8. Бактериальные эндотоксины, при проведении испытания должны быть выполнены следующие условия:

- подтвержденное отсутствие влияния материалов, используемых в испытании. Должно быть показано отсутствие эндотоксинов в воде для испытания на бактериальные эндотоксины, других реактивах и расходных материалах. Также, должна быть подтверждена чувствительность лизата амебоцитов, заявленная производителем;

- чувствительность лизата амебоцитов определенная как в присутствии, так и в отсутствии испытуемого образца, в связи с возможным влиянием на испытание. Между двумя полученными значениями чувствительности не должно быть значимой разницы.

В общей фармакопейной статье 2.1.6.8. Бактериальные эндотоксины представлены методы удаления мешающих факторов; в случае использования других методов должно быть проведено дополнительное испытание для подтверждения нейтрализации или удаления мешающих факторов.

В данной общей фармакопейной статье приведены причины установления требований к испытаниям на бактериальные эндотоксины, а также разъяснения по расчетам и интерпретации результатов.

Замена испытания Пирогенность, указанного в частной фармакопейной статье, на испытание Бактериальные эндотоксины или другие методы, например, испытание на активацию моноцитов или испытание с использованием рекомбинантного фактора C, требует подтверждения возможности проведения метода для конкретной субстанции для фармацевтического применения и (или) лекарственного препарата и получения соответствующего результата альтернативным методом, в соответствии с указаниями раздела 1. Общие сведения Фармакопеи Союза (см. также раздел 13 данной общей фармакопейной статьи).

Метод определения бактериальных эндотоксинов может быть указан в частной фармакопейной статье. Если метод не указан, используют любой из методов от A до F общей фармакопейной статьи 2.1.6.8. Бактериальные эндотоксины.