ПРИГОДНОСТЬ ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОЙ СИСТЕМЫ

Различные части применяемого оборудования должны быть квалифицированы и способны к достижению уровня функционирования, необходимого для проведения испытания или количественного определения.

Испытания пригодности системы являются неотъемлемой частью методики и используются для обеспечения надлежащего функционирования хроматографической системы. Для оценки работы колонки обычно используют следующие параметры: кажущаяся эффективность, коэффициент удерживания (коэффициент распределения масс), разрешение и коэффициент симметрии.

На хроматографическое поведение могут влиять следующие факторы:

- состав, ионная сила, температура и кажущийся pH подвижной фазы;

- скорость подвижной фазы, размеры колонки, температура колонки и давление;

- характеристика неподвижной фазы, в том числе тип хроматографического носителя (состоящий из частиц, или монолитный), размер частиц или макропор, пористость, удельная площадь поверхности;

- химическая модификация поверхности неподвижной фазы (обращенно-фазовая и другие модификации), степень химической модификации (блокирование концевых групп, т.е. эндкепирование), содержание углерода в процентах и т.д.).

При отсутствии других указаний должны выполняться следующие требования и любые другие дополнительные требования, приведенные в частной фармакопейной статье:

- при испытании на родственные примеси и количественном определении величина коэффициента симметрии пика, полученного на хроматограмме раствора сравнения, используемого для количественных расчетов, должна находиться в пределах от 0,8 до 1,5 при отсутствии других указаний;

- при количественном определении действующего вещества при значении 100% для чистого вещества, максимально допустимое относительное стандартное отклонение (s_r (%)) для заданных пределов рассчитывают из серии введений раствора сравнения по формуле:

,

где: K - константа (0,349), полученная из уравнения , в котором соответствует значению относительного стандартного отклонения (в процентах) при шести повторных вводах пробы для B = 1,0;

B - верхний предел количественного содержания, указанный в частной фармакопейной статье, минус 100%;

n - число повторных вводов раствора сравнения (3 <= n <= 6);

t_90%,n-1 - коэффициент Стьюдента t при доверительной вероятности 90% в двустороннем интервале с числом степеней свободы n - 1.

При отсутствии других указаний, максимально допустимое относительное стандартное отклонение не должно превышать соответствующих значений, приведенных в таблице 2.1.2.36.-1. Данное требование не распространяется на испытания на родственные примеси - в испытании на родственные примеси предел количественного содержания (соответствующий отношению сигнал/шум, равному 10) должен быть равен или меньше неучитываемого предела.

Таблица 2.1.2.36.-1. - Требования к повторяемости

Соответствие требованиям пригодности системы должно поддерживаться в течение всего процесса хроматографирования. В зависимости от различных факторов, таких как частота использования методики, опыта работы с хроматографической системой, аналитик подбирает подходящую схему проверки для контроля данного соответствия.