МЕТОД Е

Испытуемый раствор. Количество или объем испытуемого образца, указанные в частной фармакопейной статье, помещают в чистую сухую длинногорлую колбу Кьельдаля вместимостью 100 мл (в случае интенсивного пенообразования необходимо использовать колбу вместимостью 300 мл). Колбу закрепляют под углом 45° и, если субстанция представляет собой твердое вещество, прибавляют смесь 8 мл серный кислоты P и 10 мл азотной кислоты P в количестве, достаточном для полного смачивания испытуемого образца, если субстанция представляет собой жидкость прибавляют несколько миллилитров вышеуказанной смеси. Осторожно нагревают до начала реакции. После прекращения реакции прибавляют дополнительные порции той же смеси кислот, нагревая после каждого прибавления. Операцию повторяют до тех пор, пока объем прибавленной смеси кислот не достигнет 18 мл. Усиливают нагревание и осторожно кипятят до потемнения раствора. Охлаждают, прибавляют 2 мл азотной кислоты P и вновь нагревают до потемнения раствора. Продолжают прибавление азотной кислоты P с последующим нагреванием до тех пор, пока раствор не перестанет темнеть, затем сильно нагревают до появления плотных белых паров. Охлаждают, осторожно прибавляют 5 мл воды P, осторожно кипятят до появления плотных белых паров и продолжают нагревание до получения остатка объемом 2 - 3 мл. Охлаждают, осторожно прибавляют 5 мл воды P и определяют окраску раствора. Если раствор имеет желтую окраску, осторожно прибавляют по каплям 1 мл раствора водорода пероксида концентрированного P, вновь нагревают до появления плотных белых паров и продолжают нагревание до получения остатка объемом 2 - 3 мл. Если окраска раствора все еще остается желтой, повторно прибавляют 5 мл воды P и 1 мл раствора водорода пероксида концентрированного P до обесцвечивания раствора. Охлаждают, осторожно разводят водой и переносят в пробирку вместимостью 50 мл для сравнения окраски, контролируя, чтобы общий объем раствора не превышал 25 мл. Доводят pH раствора до значения 3,0 - 4,0 раствором аммиака концентрированным P1 (при приближении к указанному значению pH можно применять раствор аммиака разбавленный P1), используя в качестве внешнего индикатора индикаторную бумагу, действующую в узком интервале pH, затем доводят объем раствора водой P до 40 мл, перемешивают и прибавляют 2 мл буферного раствора с pH 3,5 P. К полученной смеси прибавляют 1,2 мл тиоацетамида реактива P и тотчас перемешивают. Доводят объем раствора водой P до 50 мл и перемешивают.

Раствор сравнения. Параллельно в таких же условиях готовят раствор сравнения, используя вместо испытуемого образца указанный в частной фармакопейной статье объем стандартного раствора свинца ионов (10 ppm Pb²⁺) P.

Проверочный раствор. Готовят аналогично испытуемому раствору, прибавляя к испытуемому образцу объем стандартного раствора свинца ионов (10 ppm Pb²⁺) P, указанный в частной фармакопейной статье для приготовления раствора сравнения.

Контрольный раствор. Готовят аналогично испытуемому раствору, но без добавления испытуемого образца.

Через 2 мин сравнивают растворы, просматривая их перпендикулярно-вертикальной оси пробирок на белом фоне. Результаты испытания считают достоверными, если: - раствор сравнения имеет коричневую окраску по сравнению с контрольным раствором;

- интенсивность окраски проверочного раствора равна или превышает интенсивность окраски раствора сравнения.

Испытуемый образец выдерживает испытание, если интенсивность коричневой окраски испытуемого раствора не превышает интенсивность окраски раствора сравнения.

Если однозначная оценка результата вызывает затруднение, растворы фильтруют через подходящий мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм. Для обеспечения медленного и равномерного фильтрования давление на поршень шприца должно быть умеренным и постоянным. Сравнивают окраску пятен на фильтрах, полученных при фильтровании разных растворов.