2.1.11.14. ФОСФОР В ПОЛИСАХАРИДНЫХ ВАКЦИНАХ

Испытуемый раствор. Содержимое упаковки с испытуемым образцом количественно переносят в мерную колбу подходящего объема и доводят водой P для получения раствора полисахарида с концентрацией около 5 мг/мл. Раствор разводят до концентрации фосфора около 6 мкг/мл. Переносят 1,0 мл полученного раствора в пробирку из термостойкого стекла вместимостью 10 мл.

Растворы сравнения. 0,2194 г калия дигидрофосфата P растворяют в воде P и доводят тем же растворителем до объема 500,0 мл (основной раствор с концентрацией фосфора 0,1 мг/мл). 5,0 мл полученного раствора доводят водой P до объема 100,0 мл (разбавленный раствор с концентрацией фосфора 0,005 мг/мл). Переносят 0,5 мл, 1,0 мл и 2,0 мл разбавленного раствора в 3 пробирки из термостойкого стекла.

Компенсационный раствор. Готовят в пробирке из термостойкого стекла, используя 2,0 мл воды P.

В каждую пробирку прибавляют по 0,2 мл серной кислоты P. Пробирки нагревают в масляной бане при температуре 120 °C в течение 1 ч, а затем при температуре 160 °C до появления белого дыма (около 1 ч). Прибавляют по 0,1 мл хлорной кислоты P и нагревают при температуре 160 °C до обесцвечивания раствора (около 90 мин). Охлаждают и прибавляют в пробирки по 4,0 мл воды P и 4,0 мл реактива аммония молибдата P. Нагревают в водяной бане при температуре 37 °C в течение 90 мин, охлаждают и доводят водой P до объема 10,0 мл. Синяя окраска растворов остается стабильной в течение нескольких часов.

Измеряют оптическую плотность (2.1.2.24) растворов при длине волны 820 нм относительно компенсационного раствора.

Строят калибровочную кривую зависимости оптической плотности трех растворов сравнения от соответствующего содержания фосфора и с ее помощью определяют концентрацию фосфора в испытуемом растворе.

201110015-2023