3.3.2. Приготовление инокулята

Выросшие культуры тест-штаммов бактерий (в том числе, C. sporogenes, выращенную в анаэробных условиях) и C. albicans смывают с поверхности скошенного агара стерильным 0,9% раствором натрия хлорида. Готовят взвесь каждого тест-штамма, соответствующую 10 ЕД по оптическому стандартному образцу мутности.

Концентрацию клеток B. subtilis, B. cereus, C. albicans, A. brasiliensis доводят до 1 x 10⁷ КОЕ/мл; S. aureus, P. aeruginosa, C. sporogenes, A. faecalis - до 1 x 10⁹ КОЕ/мл.

Культуру C. novyi, выращенную на жидкой среде культивирования для анаэробных микроорганизмов (2 пересева), после центрифугирования 3000 об/мин в течение 20 мин разводят стерильной жидкостью следующего состава:

Для смыва конидий A. brasiliensis используют стерильный 0,9% раствор натрия хлорида, содержащий 0,05% твина-80. Количество конидий в 1 мл смыва определяют с помощью камеры Горяева или посевом подходящего разведения на агар Сабуро или среду N 2.

Стандартизованные взвеси бактерий и грибов доводят стерильным 0,9% раствором натрия хлорида методом последовательных десятикратных разведений до концентрации 10 - 100 КОЕ/мл для посева в жидкие и полужидкие питательные среды для определения их ростовых свойств.

Для подтверждения полученной концентрации инокуляты бактерий, в том числе, C. sporogenes (при условии инкубации последнего в анаэростате), высевают на соево-казеиновый агар (среду N 1 или специализированную среду для клостридий соответственно) по 0,1 мл из взвеси с концентрацией 10³ КОЕ/мл, C. novyi - на специальную среду для клостридий. Инокуляты грибов высевают на агар Сабуро (или среду N 2).