Подготовлена редакция документа с изменениями, не вступившими в силу

3.2.1. Рандомизированная постановка с использованием двух доз (на примере биологической активности гонадотропина хорионического)

Если в качестве тест-объекта используют крыс-самок, то в качестве ответа животного принимают отношение массы матки в мг к массе тела в г. В случае использования самцов, ответ животного представляет собой отношение массы добавочных половых желез в мг к массе тела в г.

Для определения активности гонадотропина хорионического использовали 4 группы крыс-самок по 10 особей в каждой. Каждую из доз испытуемого образца и стандартного образца, вводили одной группе животных (соотношение доз 1:2).

В таблице 3.2.1.-2 даны ответы крыс-самок на введение двух доз стандартного образца и двух доз испытуемого образца.

Таблица 3.2.1.-2. - Относительная масса матки крыс (рандомизированная постановка с использованием двух доз на примере биологической активности гонадотропина хорионического)

Группа 1

Группа 2

Группа 3

Группа 4

s1

s2

u1

u2

0,398

2,233

0,533

3,447

0,443

2,129

0,663

3,123

0,483

2,872

0,434

3,354

0,623

2,732

0,710

1,769

0,462

3,043

0,637

4,382

0,619

2,717

0,470

3,525

0,436

2,939

0,650

3,331

0,495

1,785

0,600

3,995

0,568

3,474

0,820

2,977

0,593

3,120

0,512

2,556

Для того чтобы проверить статистическую значимость источников вариации, пригодность результатов и вычислить дисперсию опыта, проводят дисперсионный анализ полученных данных. При этом рассчитывают значения дисперсий для 6 источников (таблица 4 Приложения).

Для этого на основании данных, представленных в таблице 3.2.1.-2 и 3.2.1.-3, а также поправочного коэффициента, вычисляют суммы квадратов источников дисперсии.

Таблица 3.2.1.-3. - Суммы ответов и контрасты (рандомизированная постановка с использованием двух доз на примере биологической активности гонадотропина хорионического)

Стандартный образец 00001349.wmz

Испытуемый образец 00001350.wmz

Сумма

Малая доза

S1 = 5,12

U1 = 6,03

Большая доза

S2 = 27,04

U2 = 32,46

Сумма

S = 32,16

U = 38,49

00001351.wmz

Линейный контраст

Ls = S2 - S1 = 21,92

LU = U2 - U1 = 26,43

00001352.wmz

Поправочный коэффициент

00001353.wmz;

00001354.wmz;

00001355.wmz;

00001356.wmz;

00001357.wmz;

00001358.wmz;

Отклонение = итог - постановки = 67,23 - 59,94 = 7,29.

Значимость различий дисперсий проверяют с помощью критерия Фишера. Обязательным является выполнение требований для показателей Регрессия и Непараллельность. Эти требования заключаются в том, что для Регрессии наблюдаемое значение критерия Фишера должно быть больше критического (p = 0,01), а для Непараллельности - меньше критического (p = 0,05).

Для того чтобы найти Fнабл., средние квадраты показателей делят на средний квадрат показателя Отклонение. Полученные результаты сравнивают с табличными критическими значениями критерия Фишера (таблица 3 Приложения). Число степеней свободы f1 = 1, а af2 = 36.

Таблица 3.2.1.-4. - Сводная таблица дисперсионного анализа (рандомизированная постановка с использованием двух доз на примере биологической активности гонадотропина хорионического)

Источник дисперсии (показатель)

Число степеней свободы (f)

Сумма квадратов

Средний квадрат 00001359.wmz

Наблюдаемое значение критерия Фишера

Fнабл.

Критическое значение критерия Фишера

Fкритич.

Препараты

1

0,99

0,99

Регрессия

1

58,44

58,44

292,2

> 7,40

(p = 0,01)

Непараллельность

1

0,51

0,51

2,55

< 4,11

(p = 0,05)

Постановки

k - 1 = 4 - 1 = 3 = fn.

59,94

19,98

Отклонение

N - 1 - fn. - m = 39 - 3 = 36

7,29

0,20

Итог

N - 1 - m = 39

67,23

n = 10 (число ответов в группе); N = 40 (общее число ответов в опыте); m = 0 (число утраченных и замененных значений).

Дисперсионный анализ показал пригодность результатов опыта: статистическую значимость дозозависимости (Регрессия) и параллельность двух линий регрессии (Непараллельность).

Вычисление биологической активности и ее доверительных границ

Соотношение доз равно 2, следовательно I = lg2,0 = 0,3010;

t = 2,03 при f = 36 и p = 0,05;

00001360.wmz;

00001361.wmz;

00001362.wmz;

00001363.wmz;

AU = 1000 ЕД/фл.

00001364.wmz;

Биологическая активность

RU = 103,039 = 1093,96 МЕ/фл.

C = E / (E - s2t2) = 58,44 / (58,44 - 0,20 · 2,032) = 1,014.

Логарифмические доверительные границы биологической активности испытуемого образца вычисляют по формуле:

00001365.wmz.

Логарифмические доверительные границы биологической активности испытуемого образца составляют 0,0036 и 0,0755. Нижняя и верхняя доверительная граница составляет 00001366.wmz и 00001367.wmz, т.е. 1008,3 МЕ/фл. и 1189,9 МЕ/фл. соответственно.