3.2.2. Рандомизированная постановка с использованием трех доз (на примере биологической активности гонадотропина хорионического)

Если в качестве тест-объекта используют крыс-самок, то в качестве ответа животного принимают отношение массы матки в мг к массе тела в г. В случае использования самцов, ответ животного представляет собой отношение массы добавочных половых желез в мг к массе тела в г.

Для определения активности гонадотропина хорионического использовали 6 групп крыс-самок по 10 особей в каждой. Каждую дозу испытуемого образца и стандартного образца, вводили одной группе животных (соотношение доз 1:2).

В таблице 3.2.2.-5 даны ответы крыс-самок на введение трех доз стандартного образца и трех доз испытуемого образца.

Таблица 3.2.2.-5. - Относительная масса матки крыс (рандомизированная постановка с использованием трех доз на примере биологической активности гонадотропина хорионического)

Для того чтобы проверить статистическую значимость источников вариации, пригодность результатов и вычислить дисперсию опыта, проводят дисперсионный анализ полученных данных. При этом рассчитывают значения дисперсий для 8 источников (сводная таблица 3.2.2.-7).

Таблица 3.2.2.-6. - Суммы ответов и контрасты (рандомизированная постановка с использованием трех доз на примере биологической активности гонадотропина хорионического)

Таблица 3.2.2.-7. - Сводная таблица дисперсионного анализа (рандомизированная постановка с использованием трех доз на примере биологической активности гонадотропина хорионического)

n = 10 (число ответов в группе); N = 60 (общее число ответов в опыте); m = 0 (число утраченных и замененных значений).

Для этого на основании данных, представленных в таблице 3.2.2.-5 и 3.2.2.-6, а также поправочного коэффициента, вычисляют суммы квадратов источников дисперсии.

Поправочный коэффициент

;

;

;

;

;

;

;

;

Отклонение = итог - постановки = 74,04 - 60,9 = 13,14.

Значимость различий дисперсий проверяют с помощью критерия Фишера. Обязательным является выполнение требований для показателей Регрессия, Непараллельность, Квадратичность и Разность квадратичностей. Для Регрессии наблюдаемое значение критерия Фишера должно быть больше критического (p = 0,01), а для остальных показателей - меньше критического (p = 0,05).

Для того чтобы найти F_набл. средние квадраты показателей делят на средний квадрат показателя Отклонение. Полученные результаты сравнивают с табличными критическими значениями критерия Фишера (таблица 3 Приложения). Число степеней свободы f₁ = 1, а f₂ = 54.

Дисперсионный анализ показал пригодность результатов опыта: статистическую значимость дозозависимости (Регрессия), параллельность и линейность двух линий регрессии (Непараллельность, Квадратичность и Разность квадратичностей).

Вычисление биологической активности и ее доверительных границ

Соотношение доз равно 2, следовательно I = lg2,0 = 0,3010;

t = 1,958788 + 2,429953 / f + 2,189891 / f² +

+ 4,630189 / f³ + 1,398179 / f⁹ = 2,00

при f = 54 и p = 0,05;

;

;

;

;

Ожидаемая активность A_U = 1000 МЕ/фл.

;

Биологическая активность

R_U = 10^3,075 = 1188,50 МЕ/фл.;

C = E / (E - s²t²) = 58,44 / (58,44 - 0,24 · 2,00²) = 1,017.

Логарифмические доверительные границы биологической активности испытуемого образца вычисляют по формуле:

.

Логарифмические доверительные границы биологической активности испытуемого образца составляют 0,0114 и 0,1411. Нижняя и верхняя доверительная граница составляет и , т.е. 1026,6 МЕ/фл. и 1383,9 МЕ/фл. соответственно.