Приложение N 3

к главе 2 Правил

проведения исследований

биологических лекарственных средств

Евразийского экономического союза

ТРЕБОВАНИЯ

К СТАТИСТИЧЕСКИМ ПОДХОДАМ ИНТЕРПРЕТАЦИИ РЕЗУЛЬТАТОВ

ИСПЫТАНИЯ НА ВИРУСЫ

1. При определении титра вирусов возникают те же проблемы, что и для всех биологических методов анализа. Чтобы определить достоверность исследования, необходимо проанализировать правильность (accuracy) определения вирусных титров и факторов (коэффициентов) снижения вирусной нагрузки, полученных на их основании, и провести валидацию методик. Целью статистического анализа является подтверждение проведения исследования с приемлемым уровнем компетентности в отношении вирусологических данных.

2. Аналитические методики могут быть качественными и количественными. К качественным методикам относятся методики определения инфицирующей способности на животных и методики инфекционной дозы на культуре ткани (TCID), в которых подсчитывается количество инфицированных и неинфицированных животных или клеток. Затем по доле инфицированных животных или клеток определяются инфицирующие титры. В количественных методиках определяемая инфекционность зависит от вирусной нагрузки. К количественным методикам относятся методики бляшкообразования, в которых каждая бляшка принимается за одну инфекционную единицу, ПЦР в режиме реального времени. Результаты применения как качественных, так и количественных аналитических методик подлежат статистической обработке.

3. Вариабельность результатов методик может быть обусловлена ошибками при разведении, статистическими (случайными) эффектами и различиями в аналитических системах, которые либо неизвестны, либо трудно поддаются контролю. При сравнении результатов различных аналитических циклов (вариация между циклами (between-assay variation)) величина таких эффектов оказывается выше результатов внутри одного цикла (вариация внутри цикла (within-assay variation)).

4. Границы 95% доверительных интервалов результатов внутри одного цикла должны, как правило, укладываться в интервал 0,5 lg от среднего. Вариабельность внутри цикла оценивается с помощью стандартных статистических тестов. Вариабельность между циклами можно определить путем включения препарата сравнения, значение активности (potency) которого должно укладываться в 0,5 lg от среднего значения, установленного в лаборатории, чтобы методика была приемлемой. При должном обосновании допускается использовать методики с худшей прецизионностью.

5. По возможности в исследованиях по очистке с использованием "релевантных" и специфичных "модельных" вирусов необходимо рассчитывать границы 95% доверительных интервалов для установленного фактора (коэффициента) снижения вирусной нагрузки. Если границы 95% доверительных интервалов для вирусологических методик изучения исходного материала равны s, а для вирусологических методик изучения материала на следующем этапе обработки равны a, то границы 95% доверительных интервалов для фактора (коэффициента) снижения равны:

(1)