VI. ПРОВЕДЕНИЕ ЭЛЕКТРОФОРЕЗА В АГАРОЗНОМ ГЕЛЕ

6.1. Приготовление 2%-ного агарозного геля:

- к 1 г агарозы добавить 50 мл 1х буфера ТВЕ, тщательно перемешать;

- полученный раствор поместить в микроволновую печь на 2 - 5 мин или прокипятить на водяной бане 15 мин до полного расплавления агарозы;

- расплавленную агарозу охладить до 56 °C, добавить 5 мкл бромистого этидия, тщательно перемешать, разлить в подготовленную форму, толщина геля 0,5 - 0,7 см, через 30 - 40 минут удалить гребенку;

- готовый гель использовать сразу или хранить в 1х ТВЕ буфере в холодильнике при +4 °C.

6.2. Проведение электрофореза:

- 10 мкл реакционной смеси после аплификации внести в лунку геля, в одну из лунок внести маркер молекулярной массы:

- поместить заполненный гель в камеру для электрофореза с буфером 1х ТБЕ, толщина слоя буфера над поверхностью геля ~ 2 - 3 мм;

- провести электрофорез в режиме постоянного напряжения 100V 70 - 90 минут;

- гель (без формы) поместить на экран трансиллюминатора;

- документировать результат фореза при помощи гель-документирующей системы, фотокопию геля приложить к отчету по идентификации.