Оценка соблюдения обязательных требований, содержащихся в данном документе, привлечение к административной ответственности за их несоблюдение допускаются до 1 сентября 2025 года (Постановление Правительства РФ от 31.12.2020 N 2467).
Приказ Росрыболовства от 04.08.2009 N 695 (ред. от 22.12.2016) "Об утверждении Методических указаний по разработке нормативов качества воды водных объектов рыбохозяйственного значения, в том числе нормативов предельно допустимых концентраций вредных...

3.3. Условия лабораторного содержания

Монокультуру простейших культивируют при комнатной температуре 20+/-2 °C на искусственной морской среде в чашках Петри при естественном освещении, предохраняя от воздействия прямых солнечных лучей, или в люминостате.

Используется обычное лабораторное оборудование, приборы, посуда и реактивы, в том числе:

реактивы для приготовления искусственной морской среды;

вода дистиллированная;

бумага фильтровальная;

колбы на 1000 см3;

градуированные мерные пипетки на 10, 5, 1, 0,1 см3;

пипетки для пересадки простейших (Пастеровские пипетки с укороченным концом);

мерные колбы на 100 см3;

мерные пробирки на 10 см3;

чашки Петри;

микроаквариумы (блок камер из оргстекла);

бинокуляр МБС-9 или МБС-10;

оксиметр;

рефрактометр для измерения солености воды;

pH-метр;

двухромовокислый калий K Cr O марки "хч" или стандарт-титр калия

2 2 7

двухромокислого;

культура простейших;

сухие пекарские дрожжи.

Среда для культивирования - традиционно используемая для простейших.

Для приготовления искусственной морской среды делают запас морской воды

соленостью 70 промилле следующего состава (в граммах на 1 дм3): NaCl -

55,30; MgSO x 2H O - 13,84; MgCl x 6H O - 11,02; CaCl x 6H O - 2,9;

4 2 2 2 2 2

KCl - 1,3; NaHCO - 0,5; NaNO - 0,2; NaBr - 0,2; NaHPO - 0,1; KJ - 0,01;

3 3 4

SrCl - 0,03.

2

Все компоненты растворяют отдельно, через одни сутки сливают вместе и общий объем доводят дистиллированной водой до 1 дм3. При хранении морской воды в растворе может выпасть очень незначительный осадок солей, отфильтровывать который не рекомендуется.

Для разведения искусственной морской воды соленостью 70 промилле до нужной солености пользуются формулой Хлебович (1974) : X = (1000 x c) / a,

где X - количество морской воды, необходимое для получения искомой солености в 1000 мл дистиллированной воды;

a - соленость исходной воды (70 промилле);

c - соленость искомой воды.

Можно использовать для приготовления искусственной морской воды готовую профессиональную морскую соль.

В качестве корма используют хорошо высушенные и измельченные пекарские дрожжи, которые легко хранить в закрытой посуде. Вносят их в чашки Петри в очень небольшом количестве на кончике скальпеля.

Два раза в неделю рекомендуется просматривать состояние культуры в чашках Петри. Через две недели культуру пересевают, т.е. 100 - 300 особей пипеткой переносят в чашку Петри с чистой средой, куда добавляют корм.

Периодически (не реже 1 раза в месяц) проводят оценку физиологической

чувствительности организмов. Для этого используют эталонный токсикант

- двухромовокислый калий K Cr O марки "хч" или стандарт-титр калия

2 2 7

двухромокислого. Готовят маточный раствор двухромокислого калия

концентрацией 1 г/дм3. Далее методом разбавления готовят серию растворов с

концентрациями 100,0; 150,0; 200,0; 250,0 и 300,0 мг/дм3. Исследование

проводят в течение 24 ч. По результатам эксперимента рассчитывают летальную

концентрацию K Cr O , вызывающую гибель простейших на 50% (ЛК за 24 ч).

2 2 7 50

Если полученные значения ЛК находятся в интервале 180 - 230,0 мг/дм3, то

50

культура может быть использована для проведения экспериментов.

Если полученные значения ЛК не попадают в интервал 180 - 230,0

50

мг/дм3, эксперименты с простейшими не проводят, выясняют причину,

эксперимент повторяют.

Для получения из природных проб морской воды монокультуры простейших, растущих в лабораторных условиях на искусственной морской среде той же солености, используют соответствующие методические разработки (Методические указания по морским токсикологическим биотестам. М.: ВНИРО, 1978; Методические рекомендации по биотестированию природных, сточных вод и отдельных загрязняющих веществ. М.: ВНИРО, 1982).

3.2. Характеристика тест-объекта 3.4. Проведение исследований