Оценка соблюдения обязательных требований, содержащихся в данном документе, привлечение к административной ответственности за их несоблюдение допускаются до 1 сентября 2025 года (Постановление Правительства РФ от 31.12.2020 N 2467).
Приказ Росрыболовства от 04.08.2009 N 695 (ред. от 22.12.2016) "Об утверждении Методических указаний по разработке нормативов качества воды водных объектов рыбохозяйственного значения, в том числе нормативов предельно допустимых концентраций вредных...

3.4. Проведение исследований

Перед постановкой опытов культуру простейших необходимо вывести в экспоненциальную фазу развития, что достигается пересевом культуры за трое суток до постановки опытов в чашку Петри с добавлением корма.

Эксперименты можно проводить как в чашках Петри объемом 25 см3, так и в камерах с рабочим объемом 4 см3. Плотность посадки в чашках Петри (с рабочим объемом 10 мл) 10 организмов, в камерах с рабочим объемом 4 мл - 5 организмов. Повторность - двух- или трехкратная.

Для предварительных и окончательных экспериментов удобно использовать камеры из органического стекла с рабочим объемом 4 см3. Блок камер состоит из двух склеенных между собой пластин размером 20 - 21 x 7 - 8 см. В верхней пластине толщиной около 1 см просверливают отверстия диаметром 3 см. Нижняя пластина толщиной около 0,5 см служит дном. В блоке 12 камер (лунок), которые расположены в два ряда по шесть в каждом. В каждую лунку вносят по 5 парамеций. Пять рядов используют для различных концентраций вещества, а шестой - для контроля. Повторность при этом двухкратная (два ряда лунок в блоке). Сверху микроаквариум закрывают стеклянной пластинкой соответствующего размера, что препятствует испарению раствора.

В качестве показателей токсического действия целесообразно использовать выживаемость и темп деления простейших.

В первом случае в камерах из органического стекла (объем 4 см3)

определяют концентрации вещества, вызывающие гибель (LC , LC , LC ) или

16 50 100

любое повреждающее действие (EC , EC , EC ) подопытных организмов за

16 50 100

определенный срок. Длительность опыта определяется токсичностью среды и

составляет обычно от нескольких часов до 5 суток. Контролем служит

культуральная среда. Наблюдения проводят под бинокуляром каждые сутки.

Эксперименты на простейших проводят в два этапа (предварительный и

окончательный). В предварительном эксперименте находят интервал токсических

концентраций. Опыты ставят в широком диапазоне концентраций вещества,

причем предыдущую концентрацию последовательно увеличивают в 10 раз (0,1;

1,0; 10,0 и т.д.). В окончательном эксперименте, установив диапазон

действия вещества, разбивают найденный интервал на пять равных концентраций

и устанавливают ЛК .

50

Темп деления простейших определяют в микроаквариумах (планшет с ячейками (лунки диаметром 1 см, глубина 0,5 см). Планшет с микроаквариумами представляет собой стеклянный или изготовленный из оргстекла квадратный или прямоугольный брусок толщиной 1 см с пятью рядами полированных лунок. В каждом ряду, соответственно, 5 или 10 лунок. Микроаквариумы накрывают стеклянной пластинкой, предохраняя испарение среды из лунок.

Лунки в каждом ряду (5 - 10 лунок) заполняются раствором вещества определенной концентрации. В каждую лунку микроаквариума помещают по одному организму. Ежесуточно в течение нескольких суток (3 - 5 суток) подсчитывают количество организмов в каждой лунке каждого ряда, оставляя, после подсчета организмов, в лунке исходное количество организмов (1 экземпляр), удаляя лишние организмы. Или можно по одному организму переносить в соответствующую лунку с теми же концентрациями вещества аналогичного планшета с микроаквариумами.

3.3. Условия лабораторного содержания 3.5. Учет и анализ результатов