4.2.3.4. Проведение эксперимента

4.2.3.4. Проведение эксперимента. В опытные стаканы заливают по 40 см3 испытуемых растворов и контрольной воды и помещают в них по 4 экземпляра одновозрастных цериодафний возрастом 6 +/- 2 часа, повторность пятикратная. Рачков ежедневно кормят зелеными водорослями в концентрации 250 - 500 тыс. кл/см3. Смену растворов проводят через сутки до начала размножения рачков и ежедневно в последующем. При смене растворов сохраняют соотношение 10 см3 на 1 исходную цериодафнию, если рачки погибают, количество раствора пропорционально уменьшают.

Продолжительность опытов с каждым поколением цериодафний определяется временем появления четырех пометов у контрольных рачков, что составляет около 10 суток, а общая продолжительность опытов на трех генерациях - от 20 до 25 суток.

Схема постановки опытов на поколениях цериодафний аналогична постановке опытов с дафниями.

В хроническом опыте ведут учет выживаемости и размножения цериодафний. При наблюдении за размножением учитывают время наступления половозрелости и первого помета, количество молоди в пометах и количество патологических отклонений (абортивные яйца и эмбрионы, уродливая и мертворожденная молодь).

Наблюдения в опытах ведут ежедневно, регистрируемые результаты заносят в таблицу по форме 1 и 2 (п. 4.1.4 Приложения 2).

По окончании опытов с каждым поколением цериодафний подсчитывают среднее значение по суткам выживаемости, плодовитости в пересчете на одну самку за 4 помета, процент патологических отклонений от величины реальной плодовитости. Результаты опытов сравнивают с контролем, достоверность отклонений определяется обычными методами вариационной статистики.

Достоверность получаемых результатов в хроническом опыте можно считать надежной, если соблюдены следующие условия:

а) гибель в контроле на конец опыта не превышает 10%;

б) 4 помета в контроле получены за срок около 10 суток;

в) количество молоди на 1 самку за 4 помета в контроле не менее 20 штук;

г) время наступления половозрелости у цериодафний в контроле не превышает 5 суток;